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背景介绍:
定性检测精液样本中精子凋亡,用于评价精子细胞的存活状态。不用于辅助生殖。
精液中的精子细胞的早期凋亡,使精子保持完全细胞结构的同时,但失去了授精能力,若未进行染色检测,精液常规检测难以区分,容易造成误诊。精液中的生精细胞检查和生精细胞凋亡的观察,目前已成为精液分析的一项重要指标。目前检测精子凋亡常见技术包括显微镜检测法和流式细胞术法。检测生殖细胞的凋亡对于不育的临床诊疗具有重要意义。技术:
Annexin V是一种分子量为35.8 KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine, PS)高亲和力特异结合。FITC-Annexin V结合到凋亡细胞后,在蓝色光的激发下,发出绿色荧光。碘化丙啶(Propidium iodide,PI)是一种核酸染料,不能穿透完整细胞膜,但可对凋亡晚期细胞和死细胞染色,生成红色荧光。可通过荧光颜色的转变来检测精子存活状态的变化。